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采用PCR或等溫擴增的方法來擴增DNA（或RNA）時，反應溫度在50℃以上，反應體積介于10-100 ul之間，并且可能需要在樣品上覆蓋一層油性物質或采取相似的封閉操作。這是因為，在反應的過程中伴隨的蒸發(fā)現象致使反應體積不可過小，另一方面，較大的反應體積會消耗更多的耗材，并且在循環(huán)擴增過程中無法有效的進行溫度控制（達到預定的溫度需要較長的時間）。TwistDx’s提出的重組酶聚合酶擴增（RPA）技術對這一難題給出了解決方案。重組酶聚合酶擴增反應可在低溫（通常在37-42℃，可以在更低溫度下進行）下進行，反應迅速，用時短（通常在3-15 min完成反應），即便不在反應體系上覆蓋油層或采取其它的密封措施仍可大大降低蒸發(fā)造成的影響。低溫運行，可有效防止背景噪聲，使結果更，即便需要更長的時間達到*反應溫度也不會影響實驗結果。因此，RPA技術的優(yōu)點在于，既可用于微體積反應（數字方法），也可用于大體積反應體系，例如具有簡單生物樣本的低復雜性分子檢測。文中展示了RPA技術用于不同體積反應體系的實驗結果，反應在標準的PCR管（0.2 ml）中進行，各反應體系均未采取油密封或其它密封操作。
原文：
Recombinase Polymerase Amplification (RPA) an isothermal technique suitable for a range of applications- Evaluation of RPA volume tolerance. BioTechniques 62:190 (April 2017).
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